產(chǎn)品展示PRODUCTS
一、微生物李斯特菌檢測板產(chǎn)品介紹1、微生物李斯特菌檢測板原理及適用范圍李斯特菌檢測板是一種預先制備好的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品,含有標準的營養(yǎng)培養(yǎng)基,選擇性試劑,冷水可溶性吸水凝膠和β-D-葡萄糖苷酶(β-D-glucosidase)的顯色底物( X-GLU ),適用于檢測或者計數(shù)食品及環(huán)境樣品中的李斯特菌菌數(shù)。李斯特菌檢測板檢測的李斯特菌包括單核細胞增生李斯特菌(Listeria.monocytogenes ),英諾克李斯特菌(Listeria.innocua),威氏李斯特菌(Listeria.welshi),但不能區(qū)分各種菌。 2、操作方法2.1 食品樣品檢測2.1.1 食品樣品處理:取樣品25 g(mL)放入裝有225 mL滅菌磷酸鹽緩沖液(或生理鹽水)的取樣罐或均質袋內(nèi),制成1:10的樣品勻液。根據(jù)樣品污染程度及檢驗需要,可進一步制成10倍遞增的樣品稀釋液,選擇2~3 個適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液)來進行接種。 2.2 環(huán)境樣品檢測2.2.1 環(huán)境樣品采集:用無菌的涂抹棒或其他采樣設備收集環(huán)境樣品。濕潤采樣設備液體體積≤10 mL。濕潤劑可以為無菌水,滅菌生理鹽水(磷酸鹽緩沖液)或者緩沖蛋白胨水。2.2.2 環(huán)境樣品處理:在收集的環(huán)境樣品中添加10 mL 滅菌生理鹽水(或磷酸鹽緩沖液),充分混勻。根據(jù)樣品污染程度及檢驗需要,可進一步制成10倍遞增的樣品稀釋液,選擇2~3 個適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液)來進行接種。 2.3 接種:將李斯特菌檢測板上層膜不干膠標簽部分揭開,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液均勻滴加到紙片上,迅速貼好上層膜并水平晃動檢測板,靜置10 s左右,待樣品勻液被吸附在濾紙上。每個稀釋度接種兩個檢測板作為重復。2.4 培養(yǎng):將檢測板疊在一起,倒置于36℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),培養(yǎng)18~24h。3、結果判讀在檢測板上生長的藍綠色點即為李斯特菌陽性點,若檢測板上無菌生長或者長出點為其他顏色點即為李斯特菌陰性。
4、計數(shù)原則及報告方式4.1 樣品計數(shù)4.1.1 以生長有30~300CFU的檢測板為計數(shù)適宜范圍。4.1.2 若只有一個稀釋度檢測板上的菌落數(shù)在計數(shù)合適范圍30~300CFU之間,則計算兩個檢測板菌落數(shù)的平均值,再除以相應的稀釋倍數(shù),作為每克(毫升)中菌落總數(shù)結果。4.1.3 若有兩個連續(xù)稀釋度在適宜計數(shù)范圍內(nèi)時,按式(1)計算: ∑C N= ———————— •••••••••••••••••••(1) (n1+0.1n2)d式中:N——樣品中李斯特菌菌落數(shù);∑C——兩個連續(xù)稀釋度檢測板(含適宜范圍菌落數(shù)的檢測板)李斯特菌落數(shù)之和;n1——適宜范圍菌落數(shù)的*個稀釋度(低)檢測板個數(shù);n2——適宜范圍菌落數(shù)的第二個稀釋度(高)檢測板個數(shù);d——*稀釋度的稀釋倍數(shù) 示例:
稀釋度
1:10(*個稀釋度)
1:100(第二個稀釋度)
菌落數(shù)
245,247
31,30
(245+247+31+30) N= ———————— =2514 (2+0.1×2)×10-1結果表述為2.5×103CFU/g(mL)。4.1.4 若所有稀釋度檢測板上均無菌落生長,則以小于1/d(d—*低稀釋倍數(shù))計算。4.1.5 低數(shù)值的估算:如果實驗樣品原液(水及液體飲料)或初始稀釋懸液(其他樣品)的兩個檢測板上的菌落數(shù)均小于30CFU,計算兩個檢測板上的菌落數(shù)的平均數(shù)。計算式(2): ∑C NE = —— •••••••••••••••••••(2) nd式中:NE——每毫升或每克樣品中菌數(shù)的估算值;∑C——兩個檢測板上菌落數(shù)的和;n——檢測板的數(shù)量;d——樣品初始懸液或實際接種懸液的稀釋倍數(shù)。4.1.6 大數(shù)值的估算:若所有稀釋度的檢測板上菌落數(shù)均大于300CFU,計數(shù)接近300CFU的檢測板上的菌落并計算出平均數(shù),其他檢測板可記錄為多不可計。結果計算式(3): ∑C NE = —— •••••••••••••••••••(3) nd式中:NE——每毫升或每克樣品中菌數(shù)的估算值;∑C——兩個檢測板上菌落數(shù)之和;n——檢測板的數(shù)量;d——與樣品懸液相*的稀釋倍數(shù)。5、結果報告固體樣品以CFU/g為單位報告,液體樣品以CFU/mL為單位報告。6、附加說明注意使用過的檢測板上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
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